HBV感染相關技術服務

一、模型簡介

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV）的生命周期是一個高度協調的分子生物學過程，其關鍵階段包括以下分子事件：病毒入侵、cccDNA形成、病毒轉錄、核衣殼組裝與逆轉錄、病毒粒子成熟與分泌、繼發感染與傳播。乙肝病毒完整生活周期如下圖：

乙肝病毒感染模型主要包括以下類型及其優劣勢：

1、原代肝細胞模型（金標準）

人原代肝細胞（Primary Human Hepatocytes, PHH）和樹鼩原代肝細胞（Tupaia Hepatocytes）具有天然的乙肝病毒易感性，感染效率高。食蟹猴原代肝細胞+hNTCP，支持HBV感染。豬原代肝細胞PPH+hNTCP，支持HBV高效感染（Mol Med Rep. 2019 Oct;20(4):3820-3828.立沃生物周明博士是第一作者；Hepatology. 2017 Sep;66(3):703-716.）優勢：直接從人或動物肝臟分離，保留天然代謝與病毒受體功能，適合研究HBV復制、藥物代謝及cccDNA清除機制。劣勢：細胞存活時間短（通常<14天），操作復雜且個體差異大，難以長期觀察慢性感染過程。

2、肝癌細胞系

肝癌細胞系包括HepG2.2.15、HepAD38、Huh7D-hNTCP，其中HepG2.2.15、HepAD38主要用于病毒制備，Huh7D-hNTCP主要用于HBV感染研究與藥物評價。肝癌細胞系Huh7DhNTCP感染效率比HepG2hNTCP更高（Virol Sin. 2017 Dec;32(6):465-475.  立沃生物周明博士是第一作者）。優勢：易培養且穩定性高，適用于高通量藥物篩選和病毒生命周期研究。劣勢：缺乏正常肝細胞極性及完整免疫微環境，無法模擬自然感染中的宿主免疫應答。

3、人源化肝小鼠模型

人源化肝小鼠模型通過基因改造構建免疫缺陷小鼠（如FRG、uPA），移植人原代肝細胞或肝祖細胞，重建功能性人源化肝臟。其支持乙型肝炎病毒（HBV）感染、藥物代謝及肝病機制研究，可模擬慢性肝炎、纖維化等病理過程，廣泛用于抗病毒藥物篩選和病毒宿主互作研究。雖成本高且缺乏完整免疫系統，但能高度還原人類肝臟生理微環境，彌補體外模型的局限性。優勢：通過移植人肝細胞或肝臟組織，支持HBV完整感染周期，適合研究慢性肝炎、纖維化及抗病毒治療評估。劣勢：成本高昂，技術復雜，且免疫系統缺陷限制了免疫機制研究。

2、3D圓球體/mini-liver感染模型

3D圓球體模型通過模擬肝臟微環境，為HBV感染機制及抗病毒藥物評價提供高仿生研究平臺。其構建通常采用原代肝細胞（PHH）和Kupffer/星狀細胞共孵育，形成極化結構及細胞間通訊網絡。相較于2D模型，該體系可維持NTCP長期高水平表達，支持病毒完整生命周期，維持HBV cccDNA長期穩定。優勢：3D圓球體模型通過模擬肝臟微環境，為HBV感染機制及抗病毒藥物評價提供高仿生研究平臺；培養時間長，最長可體外培養2個月（有可能更久，次時間為本團隊的測試時間）；

二、服務資質、條件與團隊

本公司按照GMP標準建設生物安全二級實驗室，并完成衛健委備案，病原體范圍：乙肝病毒、慢病毒等工具病毒、人體或動物樣本。生物安全二級實驗室配套檢測設備、設施價值2000余萬元，包括激光共聚焦、分選流式細胞儀、超高速離心機、實時熒光定量PCR儀等。技術團隊包括美國醫學與生物工程院院士、青年千人計劃、深圳市高層次人才等；其中，周明博士，博士畢業于中科院武漢病毒研究所，從事乙肝病毒研究14年，獲得國家自然科學基金、博士后基金、廣東省科技廳、深圳市科創委等項目資助7項，發表第一作者或通訊作者SCI論文10余篇。

三、服務流程