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I型鼠尾膠原是重要的細胞外基質,可促進細胞貼壁、維持細胞分化狀態。我們的產品是從SD大鼠尾腱中提取分離,在萬級實驗室中經過多道工序提純獲得的,保持了膠原蛋白的生物活性。經測試,可用于多種原代細胞的細胞培養,例如肝細胞、血管內皮細胞、間充質干細胞、胰島beta等細胞。
II 試劑與耗材
—膠原母液(本產品Cat: LV-collagen001)
—超純水
—醋酸母液
—0.22μm濾膜及50mL一次性注射器
—移液槍及槍頭
—培養板/皿/瓶
—生物安全柜
—37℃/5%CO2培養箱
III 包被步驟
1.在生物安全柜中 ,將5mL 醋酸母液加入到1L無菌水中配制成為醋酸工作液。
2.加入I型鼠尾膠原母液,使終濃度為50μg/mL,即每100 mL醋酸工作液中加入5 mg膠原蛋白(對應膠原母液體積為V=5mg/10mg/mL=0.5mL),4℃保存待用(不超過3個月)。
3.將膠原工作液以大于/等于5μg/cm2的包被量加入到需要包被處理的培養板/皿/瓶中,通常情況下,加入工作液為推薦培養基(見附表)使用體積的60%,如12孔板的培養基推薦使用體積為 1mL,加入0.6 mL膠原工作液即可達到飽和。
4.生物安全柜中,常溫孵育1h。延長包被時間至3小時,對后續細胞培養沒有影響。
5.將膠原工作液吸出,生物安全柜中自然晾干,封口膜封口,4℃保存不超過6個月。
6.接種細胞前,膠原包被培養板/皿/瓶需PBS或培養基清洗一次,以去除殘留的醋酸。
IⅤ特殊說明
1.本產品為冷藏發貨,收貨后可能為部分液體或者液體狀態(確保仍然低溫),屬于正常狀態。
2.I型鼠尾膠原母液儲存在-20℃。避免多次凍融,建議根據需求量進行分裝后凍存。
3.本產品為無菌液體,請放心使用,無需過濾。
4.膠原工作液可重復利用2-3次,但需避免因多次包被而造成可能的污染,如懷疑存在污染,請立即放棄使用。
附表.培養板/皿/瓶參數與液體加入推薦量
培養板 | 培養面積(cm2) | 高度(帶蓋mm) | 推薦培養液量/ mL |
6W | 9.5 | 23 | 2 |
12W | 3.6 | 23 | 1 |
24W | 1.9 | 23 | 0.5 |
48W | 0.88 | 23 | 0.3 |
96/96U/96V | 0.32 | 16 | 0.1 |
384W | 0.1135 | 16 | 0.033 |
35mm | 8.5 | 12 | 2 |
60mm | 22.9 | 15 | 5 |
100mm | 57.6 | 20 | 10 |
150mm | 150.1 | 25 | 25-30 |
T25 | 25 | 20 | 5 |
T75 | 75 | 35 | 10 |
T175 | 175 | 40 | 30 |
特殊說明
1. 本產品為冷藏發貨,收貨后可能為部分液體或者液體狀態(確保仍然低溫),屬于正常狀態。
2. I型鼠尾膠原母液儲存在-20℃。避免多次凍融,建議根據需求量進行分裝后凍存。
3. 本產品為無菌液體,請放心使用,無需過濾。
4. 膠原工作液可重復利用2-3次,但需避免因多次包被而造成可能的污染,如懷疑存在污染,請立即放棄使用。
IⅤ 聯系方式
公司電話:0755-28284050
技術支持:19902901483(周博士)