運輸方式
液氮運輸
1、吸附式液氮運輸，無游離液氮，冒白煙即說明正常。
2、溫度監測設備嚴密監控運輸過程中的罐內溫度，如發現異常可拷貝溫度記錄儀上的PDF和excel數據（溫度監測設備一頭可拔掉，顯示USB接頭，插入電腦即可拷貝數據，如遇到困難，可聯系銷售人員和技術支持解決）。
3、合金密碼鎖，保證從發出到收貨，沒有第三方可以打開液氮罐接觸細胞，保護細胞安全。
4、GPS定位器，細胞運輸軌跡全程掌握，防止丟件。
5、液氮罐、溫度監測設備、合金密碼鎖、GPS定位器為回收部件，請妥善保管，禁止破壞，否則會被拉入黑名單。
文章引用
略
適用范圍
肝Kupffer細胞是肝臟中最重要的巨噬細胞群體，占全身定居巨噬細胞的80%-90%，其在科研領域的用途廣泛，主要涉及以下方向：
1. 肝纖維化與肝硬化機制研究
Kupffer細胞通過分泌促炎因子（如TNF-α、IL-1β、TGF-β）激活肝星形細胞（HSCs），驅動纖維化進程。
M1/M2表型調控：M1型促進纖維化（分泌促炎因子和促纖維化因子），M2型則參與纖維化消退（通過分泌抗炎因子和降解細胞外基質）。
代謝重編程：研究其糖酵解、脂肪酸氧化等代謝途徑對極化的影響，為靶向代謝的抗纖維化治療提供依據。
2. 肝癌微環境與腫瘤進展研究
Kupffer細胞在肝癌發生、發展中具有雙重作用：
抗腫瘤功能：通過吞噬腫瘤細胞、分泌細胞毒性因子抑制腫瘤生長；肝癌組織中Kupffer細胞數量減少與腫瘤惡化相關。
促腫瘤機制：活化的Kupffer細胞通過分泌VEGF等促血管生成因子，重塑腫瘤微環境，支持肝癌細胞侵襲轉移。
3. 免疫調節與炎癥平衡
免疫耐受：通過清除抗原-抗體復合物、調控T細胞活性，維持肝臟免疫穩態，但也可能導致病毒持續感染或腫瘤免疫逃逸。
炎癥調控：在酒精性肝病、非酒精性脂肪肝等疾病中，Kupffer細胞通過分泌IL-10等抗炎因子抑制過度炎癥反應。
4. 藥物開發與毒性評估
抗纖維化藥物篩選：利用永生化Kupffer細胞系（如大鼠/人原代細胞）評估藥物對M1/M2極化、膠原分泌的調控效果。
納米藥物靶向：研究其清道夫受體（如Stabilin-1/2）對納米顆粒的清除機制，優化藥物遞送系統以避開非特異性攝取。
5. 代謝性疾病與跨器官互作
脂質代謝研究：Kupffer細胞通過STAT3等通路調控肝臟脂質沉積，與非酒精性脂肪肝（NAFLD）的發病機制密切相關。
腸-肝軸作用：處理腸道來源的LPS等代謝物，參與腸道菌群對肝病的影響。
總結
Kupffer細胞的科研用途覆蓋肝病機制（纖維化、肝癌）、免疫調控、藥物開發及代謝研究等多個領域，其功能異質性和代謝可塑性為疾病治療提供了新靶點。例如，靶向M1/M2極化或代謝通路可能成為抗纖維化或抗腫瘤的新策略。實驗模型（如原代細胞培養、基因編輯動物）和單細胞組學技術將進一步推動其機制解析。
由于我司產品說明書半年更新一次，以下步驟僅作參考，以公司隨貨說明書為準
II 試劑與材料
? 肝Kupffer細胞（Cat# LV- Kup001/2/3/4）
? 肝Kupffer細胞培養基（Cat# LV-KuPM001）
? 培養板（TC-treated）
? 無菌15ml離心管
? 一次性移液管
? 37℃/5%CO2培養箱
? 移液槍
? 恒溫水浴鍋（37℃預熱）
? 冷凍水平離心機（帶水平轉子，可離心15ml離心管）
? 生物安全柜
? 寬口移液槍頭
? 75%酒精
重要提示：解凍時，凍存細胞轉移必須使用液氮轉移；在整個復蘇實驗過程中必須全程使用寬口槍頭。
III 細胞的復蘇與鋪板
1. 肝Kupffer細胞培養基放入37℃恒溫水浴鍋中充分預熱。
2. 將凍存的肝Kupffer細胞從冷藏位置通過液氮迅速轉移至37℃恒溫水浴鍋中。將凍存管盡可能多的浸入37℃水中，順時針水平搖動，但必須確保凍存管管蓋保持在水面以上。
3. 解凍凍存管約90~120s，至凍存管中只有少量碎冰漂浮即可。
4. 用75%酒精消毒凍存管，并將其轉移到生物安全柜。
5. 用寬口槍頭將細胞重懸（輕輕吹打2次），并轉移至含10ml預熱培養基的15ml離心管中（注意：凍存管與槍頭上殘留細胞，可用1ml復蘇培養基潤洗凍存管與槍頭）。
6. 將細胞逐滴加入預熱培養基中，最后輕微上下顛倒3次混勻。
7. 600g，4℃離心5min，去上清并用培養基重懸。
8. 沉淀的細胞用肝Kupffer細胞培養基重懸并定容至4ml，用臺盼藍排除法測定細胞的活力和細胞總量。
9. 將細胞按3×104cells/cm2接種至TC處理培養板中。搖勻，在37℃/5%CO2培養箱中培養，24h后換液。
IV 細胞培養與傳代
1. 細胞融合度達到80%時可進行傳代。
2. 提前將培養基、PBS、胰酶放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。
3. 吸除舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使加入的胰酶能蓋住細胞，37℃孵育，約2~3min后顯微鏡下觀察。
4. 待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞板，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液（控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡）。
5. 600g，室溫離心5min，去上清并用肝Kupffer細胞培養基重懸。
6. 將細胞懸液按3×104cells/cm2接種到新的TC處理培養瓶/板內，置37℃/5%CO2培養箱中培養，隔天觀察貼壁生長情況。
細胞復蘇后不可再凍存
V 關于售后
如您發現產品有任何質量問題，請您收集原始數據，并第一時間聯系公司銷售或者技術支持，公司安排人員保證售后。每個實驗室條件不同，操作人員習慣不同，熟練程度不一樣，實驗失敗存在客觀因素。如未嚴格按照說明書操作、超過售后時限，公司不做售后，請老師理解與支持。
售后有效期與提供的原始數據：
復蘇問題：立刻報告異常；提供臺盼藍染色或者AO/PI染色。
污染問題：復蘇96小時以內；提供相差顯微鏡照片。
純度問題：一個月內；提供免疫熒光或者流式結果。
VI 聯系電話
公司電話：0755-28284050
技術支持：19902901483（周博士）
