運輸方式
液氮運輸
1、吸附式液氮運輸，無游離液氮，冒白煙即說明正常。
2、溫度監測設備嚴密監控運輸過程中的罐內溫度，如發現異常可拷貝溫度記錄儀上的PDF和excel數據（溫度監測設備一頭可拔掉，顯示USB接頭，插入電腦即可拷貝數據，如遇到困難，可聯系銷售人員和技術支持解決）。
3、合金密碼鎖，保證從發出到收貨，沒有第三方可以打開液氮罐接觸細胞，保護細胞安全。
4、GPS定位器，細胞運輸軌跡全程掌握，防止丟件。
5、液氮罐、溫度監測設備、合金密碼鎖、GPS定位器為回收部件，請妥善保管，禁止破壞，否則會被拉入黑名單。
文章引用
略
適用范圍
肝星形細胞（HSCs）在科研領域具有重要價值，其用途可總結為以下核心方向：
HSCs是肝纖維化的核心效應細胞。在病理狀態下，HSCs被激活并轉化為肌成纖維細胞，分泌大量膠原蛋白等細胞外基質（ECM），驅動纖維化進程。研究者通過體外培養激活的HSCs（如LX-2細胞系）或構建基因敲除模型（如PLVAP敲除小鼠），分析其分泌的細胞因子（如TGF-β、IL-6）、ECM成分變化及信號通路（如AKT磷酸化），以揭示纖維化分子機制和潛在治療靶點。此外，HSCs的收縮性研究還可解釋肝竇高壓的形成機制。
HSCs通過特定蛋白（如PLVAP）調控肝臟代謝底物偏好。例如，禁食狀態下，HSCs的PLVAP蛋白通過影響脂肪酸酯化和氧化，決定肝臟優先利用脂肪酸還是碳水化合物。敲除PLVAP的小鼠顯示糖代謝能力增強，胰島素信號通路激活，這為代謝性疾病（如糖尿病、脂肪肝）的研究提供了新視角。此外，HSCs儲存維生素A的特性也被用于脂溶性維生素代謝相關研究。
HSCs分泌生長因子（如HGF、VEGF）促進肝細胞增殖和血管生成，在肝損傷修復中發揮雙重作用。科研中常通過共培養系統（如HSCs與肝細胞、肝祖細胞）模擬再生微環境，分析HSCs對肝細胞功能（如白蛋白分泌、藥物代謝酶活性）的影響。此類模型還可用于探究HSCs與免疫細胞（如巨噬細胞）的互作機制，解析炎癥與再生平衡。
永生化HSCs細胞系（如LX-2、HSC-Li）是抗纖維化藥物篩選的重要工具。研究者通過體外評估藥物對HSCs增殖、α-SMA表達及膠原分泌的抑制作用，或結合動物模型驗證其療效。例如，靶向HSCs激活通路（如TGF-β/Smad、PDGF受體）的小分子抑制劑或基因療法已進入臨床前研究階段。
激活的HSCs通過分泌基質金屬蛋白酶（MMPs）和炎癥因子，參與肝癌微環境的重塑及腫瘤細胞侵襲轉移。科研中常利用HSCs與肝癌細胞共培養模型，研究其對腫瘤生長、血管生成及免疫逃逸的調控作用，為肝癌治療提供新策略。
由于我司產品說明書半年更新一次，以下步驟僅作參考，以公司隨貨說明書為準
II 試劑與材料
? 肝星形細胞（Cat# LV-HSC001/2/3/4）
? 復蘇培養基（Cat#LV-Rec001）
? 肝星形細胞培養基（Cat# LV-HSCM001）
? 膠原包被板/皿/瓶（Cat# LV-Coated）
? 無菌15ml離心管
? 一次性移液管
? 37℃/5%CO2培養箱
? 移液槍
? 恒溫水浴鍋（37℃預熱）
? 冷凍水平離心機（帶水平轉子，可離心15ml離心管）
? 生物安全柜
? 寬口移液槍頭（普通移液槍頭剪去尖頭，再滅菌使用）
? 75%酒精
重要提示：解凍時，凍存細胞轉移必須使用液氮轉移；在整個復蘇實驗過程中必須全程使用寬口槍頭。
III 細胞的復蘇與鋪板
1. 復蘇培養基放入37℃水浴鍋中充分預熱，鋪板培養基放入37℃恒溫水浴鍋中充分預熱。
2. 將凍存的肝星形細胞從冷藏位置經液氮迅速轉移至37℃恒溫水浴鍋中，盡可能多的浸入37℃水中，
1. 順時針水平搖動，但必須確保凍存管蓋子保持在水面以上。
2. 解凍凍存管約90~120s，至凍存管中只有少量碎冰漂浮即可。
3. 用75%酒精消毒凍存管，并將其轉移到生物安全柜。
4. 用寬口槍頭將細胞重懸（輕輕吹打2次），并轉移至含10ml預熱培養基的15ml離心管中（注意：凍存管與槍頭上殘留細胞，可用1ml復蘇培養基清洗凍存管與槍頭）。
5. 將細胞懸液逐滴加入預熱復蘇培養基，每1ml細胞懸液加入10ml復蘇培養基（注意：前3ml要緩慢逐滴加入并輕微搖晃，后面7ml可加快速度），最后輕微上下顛倒1次混勻。
6. 600g，4℃離心5min，去上清并用培養基重懸。
7. 沉淀的細胞用肝星形細胞培養基重懸并定容至4ml，用臺盼藍排除法測定細胞的活力和細胞總量。
8. 將細胞按3×104cells/cm2接種至膠原包被培養板中，搖勻，置37℃/ 5% CO2培養箱中培養，24小時后換液。
IV 細胞培養與傳代
1. 細胞融合度達到80%時可進行傳代。
2. 提前將培養基、PBS、胰酶放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入生物安全柜內。
3. 吸除舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，棄PBS后加適量胰酶，使加入的胰酶能蓋住細胞，37℃孵育，約2~3min后顯微鏡下觀察。
4. 待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞板，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液（控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡）。
5. 600g，室溫離心5min，去上清并用培養基重懸。
6. 將細胞懸液按3×104cells/cm2接種到新的膠原包被培養瓶/板內，置37℃/ 5% CO2培養箱中培養，隔天觀察貼壁生長情況。
細胞復蘇后不可再凍存
V 關于售后
如您發現產品有任何質量問題，請您收集原始數據，并第一時間聯系公司銷售或者技術支持，公司安排人員保證售后。每個實驗室條件不同，操作人員習慣不同，熟練程度不一樣，實驗失敗存在客觀因素。如未嚴格按照說明書操作、超過售后時限，公司不做售后，請老師理解與支持。
售后有效期與提供的原始數據：
復蘇問題：立刻報告異常；提供臺盼藍染色或者AO/PI染色。
污染問題：復蘇96小時以內；提供相差顯微鏡照片。
純度問題：一個月內；提供免疫熒光或者流式結果。
VI 聯系電話
公司電話：0755-28284050
技術支持：19902901483（周博士）
