運輸方式
液氮運輸
1、吸附式液氮運輸，無游離液氮，冒白煙即說明正常。
2、溫度監測設備嚴密監控運輸過程中的罐內溫度，如發現異常可拷貝溫度記錄儀上的PDF和excel數據（溫度監測設備一頭可拔掉，顯示USB接頭，插入電腦即可拷貝數據，如遇到困難，可聯系銷售人員和技術支持解決）。
3、合金密碼鎖，保證從發出到收貨，沒有第三方可以打開液氮罐接觸細胞，保護細胞安全。
4、GPS定位器，細胞運輸軌跡全程掌握，防止丟件。
5、液氮罐、溫度監測設備、合金密碼鎖、GPS定位器為回收部件，請妥善保管，禁止破壞，否則會被拉入黑名單。
文章引用
略
適用范圍
人肝竇內皮細胞（LSECs）作為肝臟中重要的非實質細胞，其獨特的結構和功能使其成為多個科研領域的關鍵研究對象。以下是其主要的科研用途總結：
1. 肝臟疾病機制研究
LSECs在多種肝臟病理過程中發揮核心作用，是研究肝纖維化、脂肪肝、肝癌及肝再生的重要模型：
肝纖維化與肝硬化：LSECs失窗孔（毛細血管化）是肝纖維化的早期事件，通過激活肝星形細胞（HSCs）分泌膠原蛋白，驅動纖維化進程。
脂肪肝疾病：LSECs通過脂質代謝調控（如STAT3通路）和抗炎作用，影響非酒精性脂肪肝（NAFLD）和酒精性脂肪肝（AFL）的發展。
肝細胞癌（HCC）：LSECs分泌促血管生成因子（如VEGF），參與腫瘤微環境重塑及轉移調控，其標志蛋白（如PLVAP）的異常表達與HCC預后相關。
肝再生：LSECs與肝細胞協同分泌生長因子（如HGF），促進損傷后的組織修復和功能恢復。
2. 免疫調控與耐受機制研究
LSECs在肝臟免疫微環境中具有雙重角色，是研究免疫耐受與炎癥平衡的關鍵靶點：
免疫耐受誘導：通過表達清道夫受體（如SR-H）和模式識別受體，LSECs清除病原體并抑制T細胞活化，維持肝臟的免疫耐受狀態，但也可能導致病毒持續感染或腫瘤免疫逃逸。
炎癥調控：LSECs分泌抗炎因子（如前列腺素、一氧化氮），抑制過度炎癥反應，同時通過內吞功能清除血液中的內毒素和炎性介質。
腸-肝免疫軸協調：LSECs通過調控免疫細胞遷移（如巨噬細胞、T細胞），在腸道來源的抗原處理中起橋梁作用，影響炎性肝病的進展。
3. 藥物代謝與納米醫學研究
LSECs的高效清道夫功能使其在藥物遞送與毒性評估中具有重要價值：
藥物清除機制：LSECs通過清道夫受體（如Stabilin-1/2）快速清除血液中的大分子（如脂蛋白）和納米顆粒，影響藥物半衰期及療效，是優化納米藥物設計的重要考量。
靶向治療開發：研究LSECs的清除機制可為減少藥物非特異性攝取提供策略，例如通過修飾納米顆粒表面以避開LSECs的識別。
毒性評估模型：LSECs對藥物或環境毒素的敏感性（如肝竇毛細血管化）常用于評估肝損傷機制及保護性藥物的篩選。
4. 血管生物學與微循環研究
LSECs的獨特血管特性為血管生成與微循環調控提供了研究平臺：
血管通透性調控：LSECs的窗孔結構和動態變化（受Rho-ROCK通路調控）影響肝竇內外物質交換，是研究血管通透性機制的理想模型。
凝血與抗凝平衡：LSECs分泌肝素、PGI2等抗凝因子，維持肝竇內血流暢通，其功能異常與肝病中的血栓形成相關。
血管再生研究：LSECs分泌促血管生成因子（如VEGF、Angiopoietin-2），在肝再生或腫瘤血管生成中起關鍵作用。
5. 生物材料與組織工程應用
LSECs的生物學特性在人工肝支持系統和抗凝血材料開發中具有潛力：
人工肝裝置：LSECs的內皮化表面可模擬天然肝竇的代謝和免疫屏障功能，用于構建生物反應器或器官芯片。
抗凝血材料：LSECs的天然抗凝特性（如分泌PGI2）被用于設計抗血栓涂層，改善醫療器械的生物相容性。
總結
人肝竇內皮細胞的科研用途涵蓋肝臟疾病機制、免疫調控、藥物開發、血管生物學及生物材料等多個領域，其多功能特性使其成為連接基礎研究與臨床轉化的重要橋梁。未來研究可進一步探索LSECs在代謝調控（如維生素A儲存）和跨器官互作（如腸-肝軸）中的新機制。
由于我司產品說明書半年更新一次，以下步驟僅作參考，以公司隨貨說明書為準
II 試劑與材料
? 肝竇內皮細胞（Cat# LV- LESC001/2/3/4）
? 肝竇內皮細胞培養基（Cat# LV- LSEM001）
? 膠原包被培養板/皿/瓶（LV-Coated）
? 無菌15ml離心管
? 一次性移液管
? 37℃/5%CO2培養箱
? 移液槍
? 恒溫水浴鍋（37℃預熱）
? 冷凍水平離心機（帶水平轉子，可離心15ml離心管）
? 生物安全柜
? 寬口移液槍頭（普通移液槍頭剪去尖頭，再滅菌使用）
? 75%酒精
重要提示：解凍時，凍存細胞轉移必須使用液氮轉移；在整個復蘇實驗過程中必須全程使用寬口槍頭。
III 細胞的復蘇與鋪板
1. 肝竇內皮細胞培養基放入37℃恒溫水浴鍋中充分預熱。
2.將凍存的肝竇內皮細胞從冷藏位置經液氮迅速轉移至37℃恒溫水浴鍋中，將凍存管盡可能多的浸入
1. 37℃水中，順時針水平搖動，但必須確保凍存管管蓋保持在水面以上。
2. 解凍凍存管約90~120s，至凍存管中只有少量碎冰漂浮即可。
3. 用75%酒精消毒凍存管，并將其轉移到生物安全柜。
4. 用寬口槍頭將細胞重懸（輕輕吹打2次），并轉移至含10ml預熱培養基的15ml離心管中（注意：凍存管與槍頭上殘留細胞，可用1ml復蘇培養基潤洗凍存管與槍頭）。
5. 將細胞逐滴加入預熱培養基中，最后輕微上下顛倒3次混勻。
6. 600g，4℃離心5min，去上清并用培養基重懸。
7. 沉淀的細胞用肝竇內皮細胞培養基重懸并定容至4ml，用臺盼藍排除法測定細胞的活力和細胞總量。
8. 將細胞按3×104cells/cm2接種至膠原包被培養板中。搖勻，在37℃/5%CO2培養箱中培養，24h后換液。
IV 細胞培養與傳代
1. 細胞融合度達到80%時可進行傳代。
2. 提前將培養基、PBS、胰酶放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。
3. 吸除舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使加入的胰酶能蓋住細胞，37℃孵育，約2~3min后顯微鏡下觀察。
4. 待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞板，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液（控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡）。
5. 600g，室溫離心5min，去上清并用肝竇內皮細胞培養基重懸。
6. 將細胞懸液按3×104cells/cm2接種到新的膠原包被培養瓶/板內，置37℃/5%CO2培養箱中培養，隔天觀察貼壁生長情況。
細胞復蘇后不可再凍存
V 關于售后
如您發現產品有任何質量問題，請您收集原始數據，并第一時間聯系公司銷售或者技術支持，公司安排人員保證售后。每個實驗室條件不同，操作人員習慣不同，熟練程度不一樣，實驗失敗存在客觀因素。如未嚴格按照說明書操作、超過售后時限，公司不做售后，請老師理解與支持。
售后有效期與提供的原始數據：
復蘇問題：立刻報告異常；提供臺盼藍染色或者AO/PI染色。
污染問題：復蘇96小時以內；提供相差顯微鏡照片。
純度問題：一個月內；提供免疫熒光或者流式結果。
VI 聯系電話
公司電話：0755-28284050
技術支持：19902901483（周博士）
